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細胞株培養上清液中營養物質和細胞代謝物分析

原載自:www.huanhen.cn[行情動態]  2022-11-11  瀏覽次數:1002

   對于細胞株培養時上清液的收集,把要收集上清的細胞重新在一次性培養板中培養,如果是貼壁細胞的話,在收集前24小時,改用不全培養基培養,即用不加血清的培養基。收集的時候,用移液槍吸取上清即可。
  細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,為促進細胞生長增殖提供物質基礎,是培養細胞生長和繁殖的生存環境。合成細胞培養基是用化學成分明確的試劑配制
  的培養基,是目前常用的一類培養基,其組分穩定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。培養基組分的變化,對細胞生長會產生一定影響,如細胞生長形態、分裂速度等。同時,適宜的培養基組成與優選的細胞培養工藝對于提高蛋白類藥物的產率,保證細胞培養批次之間的一致性、穩定關鍵質量屬性等因素至關重要。因此,尋求一類合適的培養基組成,對細胞株培養具有重大意義。
  細胞生長狀態的分析,除形態學觀察外,還可對細胞培養上清液中細胞代謝物進行分析,通過考察細胞上清液中營養物和代謝物的變化,判斷細胞在生長增殖過程中狀態的優劣。鑒于此開發出了“細胞培養上清液方法包”,該技術可在短時間內同時分析數十種細胞培養上清液營養成份和代謝物的相對豐度變化。
  使用高效液相色譜儀和三重四極桿質譜聯用,結合“細胞培養上清液方法”建立了細胞培養上清液中營養物質和細胞代謝物的液相色譜-串聯質譜的同時分析方法,可為相關研究人員評估細胞生長狀態、改進培養基組分提供參考。

 

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