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新聞動態(tài) / news
ATCC細胞的分類檢測是怎么完成的？
原載自：www.huanhen.cn[行情動態(tài)] 2021-09-10 瀏覽次數(shù)：1050
ATCC細胞說明書有關(guān)于細胞復(fù)蘇和傳代的詳細步驟，除說明書外，還有另外一份重要文件-COA（Certificate of Analysis）。COA中包含具體批次信息，如每管細胞的數(shù)量，建議復(fù)蘇使用的培養(yǎng)基用量，已知細胞的傳代代次等重要信息。
ATCC細胞的分類檢測步驟如下：
1.樣本儲存
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
2.試劑盒成分
人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬；植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。主要用于科研方面，不用于臨床診斷?？梢杂糜跈z測各種指標。
相關(guān)操作方法：
1.取成年新西蘭大白兔，耳緣靜脈注射空氣處死后，取下兔子的雙腿，立即用75%乙醇浸泡。
2.移入細胞房內(nèi)，去除雙腿表面的皮毛及肌肉，剪取關(guān)節(jié)段，移至超菌工作臺內(nèi)。
3.PBS洗滌數(shù)次，用手術(shù)刀或彎剪將關(guān)節(jié)表面的軟骨組織取下。
4.軟骨組織塊靜置5min，棄去上層液體及懸浮組織，將軟骨組織剪成1mm3的大小。移到離心管中加3倍體積的0.25%胰蛋白酶，置入37℃的恒溫搖床中，振蕩消化15-20min。
5.4℃靜置5min；棄上清，PBS洗滌，去上清。加入0.2%膠原酶II，置入37℃的恒溫搖床中，振蕩消化2H。
6.加入生長培養(yǎng)基終止消化，反復(fù)吹打后依次通過200目濾網(wǎng)。收集濾液，1200rpm離心8min，棄上清，用DMEM*培養(yǎng)基重新懸浮細胞，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
7.細胞傳代后放入預(yù)置有薄骨片或蓋玻片的培養(yǎng)板中進行培養(yǎng)。細胞*展開后即可固定做原代鑒定。
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