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原載自：www.huanhen.cn[技術資料頻道] 2024-11-12 瀏覽次數：300

　　細胞株在生物學研究、藥物研發、醫學診斷等眾多領域都有著至關重要的作用。為了確保細胞株的質量和穩定性，定期維護與監測不能缺少。

　　一、細胞培養環境的維護

　　細胞株培養對環境要求嚴苛，因此環境維護是關鍵。首先是培養箱的溫度，大多數哺乳動物細胞適宜在37℃左右生長，需定期校準培養箱溫度傳感器，確保溫度穩定，避免溫度波動對細胞造成損害，如溫度過高可能導致細胞蛋白變性，過低則會影響細胞的代謝速率。

　　濕度也不容忽視，一般維持在95%左右的相對濕度，可防止培養基揮發過快，保證細胞生長環境的穩定。同時，要注意培養箱內的CO?濃度，對于常用的含碳酸氫鈉緩沖體系的培養基，5%~10%的CO?濃度能維持培養基合適的pH值。定期檢查CO?供應系統和濃度監測裝置，保障CO?濃度準確。

　　二、培養基的更換與管理

　　培養基為細胞生長提供營養物質和適宜的生存條件。根據細胞類型和生長速度，定期（通常2~3天）更換新鮮培養基。在更換過程中，要注意無菌操作，防止微生物污染。同時，觀察培養基的顏色和透明度變化，若培養基變黃，可能提示細胞代謝過快或有污染；若出現渾濁，則很可能有微生物污染。

　　此外，不同細胞株對培養基成分有特定要求，要選擇合適的基礎培養基，并根據需要添加血清、生長因子等補充成分。在長期培養過程中，注意培養基批次間的差異，盡量使用同一批次或經過驗證質量穩定的培養基。

　　三、細胞形態和生長狀態的監測

　　定期觀察細胞形態是判斷細胞健康狀況的重要手段。在顯微鏡下，正常細胞應具有特定的形態特征，如貼壁細胞應呈均勻的多邊形且貼附牢固，懸浮細胞應大小均勻、圓潤。若發現細胞出現皺縮、變圓、脫落（貼壁細胞）或聚團等異常現象，可能是受到污染、營養缺乏或培養條件不適等因素的影響。

　　同時，監測細胞的生長速度。可通過細胞計數、繪制生長曲線等方法來評估。生長速度異常減慢或加快都可能提示細胞株存在問題，如細胞老化、基因突變或污染等。

　　四、微生物污染的檢測

　　微生物污染是細胞培養的大敵。要定期進行微生物檢測，包括細菌、真菌、支原體等的檢測。可使用染色法、培養法或專門的檢測試劑盒。如支原體污染較為隱匿，可采用熒光染色法或PCR檢測法。一旦發現污染，要立即處理，避免污染擴散，若細胞株被污染嚴重，可能需要丟棄并重新復蘇新的細胞株。

　　細胞株的定期維護與監測需要從環境、培養基、細胞狀態、污染檢測等多個方面入手，只有這樣才能保證細胞株的質量和穩定性，為科學研究和應用提供可靠的細胞資源。